一种调节免疫的复合物及其制备方法和用途

背景：

先天免疫和适应性免疫是免疫系统的两个重要组成部分，其中先天免疫负责识别由感染性或非感染性攻击引起的体内平衡偏差，而包含细胞介导免疫和体液免疫的适应性免疫可以特异性中和抗原并杀死受感染的细胞．

免疫系统的稳定是维持机体稳定的前提，肿瘤、化疗、压力应激、创伤、衰老等多种原因会引起免疫功能的抑制，并导致包括病毒感染、细菌感染、肿瘤在内的多种疾病。因此，恢复免疫系统的稳定，改善免疫抑制个体的免疫能力成为了治疗相关疾病的重要目标。

现有的免疫调节剂种类繁多，包括先天性免疫调节剂（如toll-like 受体激动剂，细胞因子及其类似物等）和适应性免疫调节剂（免疫检查点抑制剂PD-1/PD-L1、免疫球蛋白等），但受到高成本、众多不良反应和低应答率的限制，被FDA批准进入市场的免疫调节剂依旧数量较少。寻找新的、安全且高效的免疫调节剂成为了当务之急。

免疫抑制主要表现为免疫原性降低，包括固有免疫对抗原的识别能力以及适应性免疫对抗原的杀伤能力降低。现有的免疫调节剂虽然种类繁多，但是主要针对免疫系统中的一个环节。例如TLR受体刺激剂可以激活APCs，免疫球蛋白可以作为体液免疫的补充，胸腺肽可以刺激胸腺内淋巴细胞的增殖和分化。单一的靶点难以引起免疫的级联反应和系统间的相互作用，因此作用更广泛的免疫调节剂是被需求的。

前沿科研成果：DNA四面体和miR-155在作为新型免疫调节佐剂的用途。

miRNA是长度约为22个核苷酸的非编码RNA，研究表明，miRNA在OA发生、发展过程中具有重要的作用。但是，裸露的miRNA稳定性差、无法自主入胞、特异性差及治疗效力低等不足严重限制了其开发与应用。因此，开发能够有效递送miRNA-155至眼底，并避免脱靶效应的运载体系是亟待解决的科学问题。

DNA四面体（tetrahedral DNA，TDN），又称四面体骨架核酸（tetrahedral framework nucleic acid, tFNA）、四面体DNA纳米结构，是一种由4条单链DNA通过变性和复性，进而链间碱基互补配对形成的一种四面体结构，它易于合成，生物相容性高，通常用作某些药物的载体。

miR-155是一种保守的microRNA，参与体内免疫调节。免疫细胞内miR-155下调会引起免疫系统衰减。

目前尚未见DNA四面体或miR-155被用于免疫佐剂的报道。

研究方法： 

采用AFM、TEM、和PAGE等方法鉴定T-155 的合成；共聚焦显微镜和流式细胞术检测T-155进入视巨噬细胞和树突状细胞的能力；CCK8和流式细胞术检测T-155对树突状细胞和巨噬细胞的激活情况；qPCR、WB检测T-155对树突状细胞和巨噬细胞相关基因和蛋白的调控。

实验结果： 

T-155可以明显激活树突状细胞和巨噬细胞，并增强其识别抗原的能力。包括增强树突状细胞和巨噬细胞表面的共刺激分子，致炎因子分泌增多。此外，在体内实验中，可以看到T-155激活了固有免疫中的树突状细胞和巨噬细胞病促使下游T、B细胞的增殖。

研究结论：

本发明的T-155可以增强树突状细胞和巨噬细胞对抗原的响应能力，并增强环磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫应答能力，提高免疫抑制小鼠的固有免疫，是一种有潜力的免疫佐剂。

发表文献：ACS Appl Mater Interfaces.，IF=9  DOI: 10.1021/acsami.2c20657. 

Tetrahedral-Framework Nucleic Acid Loaded with MicroRNA-155 Enhances Immunocompetence in Cyclophosphamide-Induced Immunosuppressed Mice by Modulating Dendritic Cells and Macrophages